《表1 MADS-box基因家族PCR扩增的特异引物》

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《巴西橡胶树MADS-box基因家族6个成员的染色体物理定位》

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根据MADS-box基因家族中6个基因的登录号在NCBI上找到目的基因序列，利用NCBI上在线比对软件BLAST程序进行序列同源性比对，找到序列比对同源性最高的（98%以上）巴西橡胶树‘热研7-33-97’品种全基因组序列。使用Primer Permier5设计引物。以橡胶树基因组DNA为模板进行PCR扩增，反应程序为：94℃预变性5 min；94℃变性1 min，48～60℃退火45 s，72℃延伸90 s，30个循环；72℃后延伸7 min。将PCR产物进行凝胶电泳检测，检验产物是否为单一条带。单一条带且长度符合的PCR产物测序后用DNAMAN软件进行多序列比对，判断是否符合引物的特异性。最后将6个对应基因PCR扩增单一目的条带产物纯化，检测其浓度，于?20℃保存。筛选得到特异性引物见表1。