《表1 PCR扩增特异引物》

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《唐菖蒲脱落酸受体基因PYL1的克隆及表达分析》


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(2) 基因表达量测定:将经ABA溶液浸泡处理后的球茎提取RNA后,尽量使模板量保持一致进行cDNA反转录。从已知序列中设计一对荧光引物PF2、PR2(表1),反应体系中依次加入5μL 2×SYBR誖Premix Ex TaqTM、0.2μL PF2(10μmol/L)、0.2μL PR2(10μmol/L)、1μL cDNA模板、3.6μL ddH2O;95℃预变性3 min,95℃变性30 s,55℃退火30 s,72℃延伸30 s,40个循环。以唐菖蒲Actin为内参基因(表1),每个样品重复3次,采用2-ΔΔCt法计算表达量。