《表1 扩增基因及引物序列》

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《致仔猪脑膜炎猪链球菌的分离鉴定》


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使用细菌全基因组提取试剂盒提取WH1609全基因组。以此为模板,用16SrRNA通用引物16S-F、16S-R扩增WH1609 16SrRNA特异性片段。PCR程序:95℃5min;95℃30s,52℃30s,72℃90s,30个循环;72℃10min。PCR产物送公司测序,测序结果在NCBI上用BLAST比对。以WH1609基因组为模板,分别以水、已确定的猪链球菌为阴、阳性对照,用gdh基因特异性引物gdh-F、gdh-R及recN基因特异性引物recN-F、recN-R扩增猪链球菌特异性片段,PCR程序:95℃5min;95℃30s,52℃30s,72℃1min,30个循环;72℃10min,PCR产物进行核酸凝胶电泳。试验所用引物见表1。