《表4 PX459重组质粒的PCR鉴定体系》
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《利用CRISPR/Cas9技术建立小鼠Bdh2、Dnmt3a和Dusp9敲除新型胚胎干细胞系》
取1.2.4所得菌液加入LB培养液（含抗生素）中，37℃，250r/min摇菌2h．设计载体上游通用引物F:5’-TGCTGGCCTTTTGCTCACATG-3’，利用上游通用引物与表1中的下游引物进行PCR反应，再通过凝胶电泳检测重组载体中是否有目的基因片段．如表4所示的反应体系，将下表所列试剂加入PCR管中并充分混匀．反应条件为：98℃30s，98℃10s，55℃30s，72℃10min，35cycles；72℃10min．选择电泳结果正确的菌液送测序，若测序结果正确，将对应菌液重新摇菌后提质粒．
| 图表编号 | XD0071584600 严禁用于非法目的 |
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| 绘制时间 | 2019.09.15 |
| 作者 | 付宇婷、曹硕、陈杨林、吴宝江、多曙光、李喜和、包斯琴 |
| 绘制单位 | 内蒙古大学生命科学学院蒙古高原动物遗传资源研究中心、内蒙古大学生命科学学院蒙古高原动物遗传资源研究中心、内蒙古大学生命科学学院蒙古高原动物遗传资源研究中心、内蒙古大学生命科学学院蒙古高原动物遗传资源研究中心、内蒙古赛科星家畜种业与繁育生物技术研究院有限公司、中国科学院动物研究所实验动物中心、内蒙古大学生命科学学院蒙古高原动物遗传资源研究中心、内蒙古赛科星家畜种业与繁育生物技术研究院有限公司、内蒙古大学生命科学学院蒙古高原动物遗传资源研究中心 |
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