《表2 嵌合基因合成模板与引物》

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《苏云金芽胞杆菌Vip3AaAdAa嵌合蛋白的构建及其杀虫活性分析》

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注:片段中的数字对应的是碱基数

以嵌合基因vip3AaAdAa1的构建为例，先以本实验室保存的pET-Vip3Aa39质粒为模板，引物39F/JB2R、JB3F/39R进行PCR扩增，得到vip3Aa39的0-354、810-2370序列片段vaq1、vah1；继续以pET-Vip3Ad质粒为模板，用引物DF/JB3R进行PCR扩增，得到vip3Ad的0-810序列片段vDq1；切胶纯化后的产物vah1、vDq1为模板，通过引物DF/39R进行融合扩增，得到vipD391基因；以vipD391基因为模板，JB2F/39R为引物，扩增得到v DM391；最后以vaq1和vDM391为模板，用引物39F/39R进行PCR扩增，得到的嵌合基因即为vip3AaAdAa1。vip3AaAdAa2、vip3AaAdAa3的构建见图1和表2。