《表1 博落回克隆引物:温度对小果博落回种子萌发的影响与血根碱合成基因表达分析》

《表1 博落回克隆引物:温度对小果博落回种子萌发的影响与血根碱合成基因表达分析》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《温度对小果博落回种子萌发的影响与血根碱合成基因表达分析》


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使用试剂盒提取博落回总RNA(Tiangen#DP432),RNA含量检测使用TECAN(Nano Quant infinite M200-Pro)之后1%凝胶电泳进一步检测所提取RNA的完整性。获得完整的RNA后,使用宝生物(TAKARA)Prime ScriptTMII 1stStrand cDNA Synthesis Kit进行反转录合成cDNA。其荧光定量PCR引物(表1)根据博落回基因组序列设计,PCR扩增的模板使用反转录合成的cDNA,然后使用SYBR Green荧光染料法在ABI7300荧光定量PCR仪上进行实时荧光定量表达分析。反应条件的为:94℃30 s,94℃5 s,60℃30 s,一共40个循环,且3次重复处理。使用2-ΔΔCt方法计算数据,用Microsoft Excel软件分析输出结果,制图使用GraphPad Prism 5软件。