《表1 引物名称及序列:雷公藤中一个合成香茅醇的单萜合酶基因的克隆与表征》

《表1 引物名称及序列:雷公藤中一个合成香茅醇的单萜合酶基因的克隆与表征》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《雷公藤中一个合成香茅醇的单萜合酶基因的克隆与表征》


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取保存于-80℃的雷公藤植株材料,球磨机低温粉碎后用CTAB法进行总RNA的提取,采用TIANGENFast Quant cDNA第一链合成试剂盒(天根,北京)进行反转录,获得的cDNA作为基因克隆的模板。使用引物TwMTS-F和TwMTS-R(表1)以及Phusion HF PCR Master Mix(NEB,美国马萨诸塞州)进行PCR扩增。PCR产物切胶回收后连接到pEASY-Blunt zero克隆载体(全式金,北京)上,并转化Trans1-T1化学感受态细胞(全式金,北京),转化子用含有100 mg·L-1氨苄青霉素的LB固体培养基进行筛选并挑取单克隆进行双向测序。