《表2 突变酶G364P和GAD-WT动力学参数比较》

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《利用脯氨酸效应提高短乳杆菌谷氨酸脱羧酶的热稳定性》

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以L-Glu为底物，在pH 4.8、37℃的条件下，分别测定GAD-WT及突变酶G364P的米氏动力学常数，采用Hyperbola函数进行非线性拟合得到动力学参数，结果如表2所示。由表2可知，突变酶G364P的米氏常数Km值（45.718 mmol/L）比GAD-WT的Km值（41.283 mmol/L）高4.435 mmol/L，突变酶G364P对底物的亲和力略微下降。而突变酶G364P的kcat值（31.904 s–1）与GAD-WT的kcat值（30.461 s–1）较为接近，说明突变酶G364P的催化速率与GAD-WT相比相差不大。此外，突变酶G364P的kcat/Km为GAD-WT的0.86倍，即保留了原始GAD催化活性的86%。由此表明，突变酶G364P热稳定性得到提高的同时，并未显著降低酶的催化效率。