《表1 野生酶Ldc1E与突变酶D692N动力学参数比较》

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《亚热带山区土壤未培养微生物L-赖氨酸脱羧酶Ldc1E中关键氨基酸残基的功能鉴定》

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在温度40℃、pH值6.5的0.2 mol/L Na2HPO4-0.1 mol/L citric acid缓冲液中，以不同浓度的L-赖氨酸为底物进行酶促反应。根据Lineweaver-Burk双倒数作图得到酶学参数Km（表1），突变酶D692N与野生型酶Ldc1E相比，Km提高了1.78倍，kcat降低了20.2倍，kcat/Km降低了58.1倍。可能是Asp692突变成Asn后，在结构上缺少了一个带负电基团γ-COO-，使得Asp692对带正电底物L-赖氨酸ε-NH3+亲核攻击的能力丧失，所以突变酶D692N结合底物能力有所下降，催化反应速率降低。