《表3 Y262L突变体酶和野生酶的酶活性》

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《基于分子动力学模拟的高γ-环糊精专一性环糊精糖基转移酶理性改造》

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注：*：P<0.01，与野生组进行对比，n=3.

通过定点突变实验以Paenibacillus macerans sp.602-1作为模版，将262位点亲水性的酪氨酸突变为疏水性的亮氨酸，突变体酶Y262L与野生菌酶的活性进行比较（表3），发现Y262L相对于野生菌而言酶活性降低。经过高效液相色谱测得突变酶Y262L相较于野生酶总产量有所减少；其中产生α-CD的比例有明显降低，从原来的51.5%降低到16.7%，总体降低了2/3；野生菌Paenibacillus macerans sp.602-1产生的γ-CD占总CD产量的比例为13.7%（质量比），而改造后的Y262L突变体产生的γ-CD占总CD产量的比例达到39.9%（质量比），突变体相对于野生菌产γ-CD的比例增加了3倍（表4）。实验还研究了针对K234位点的定点突变，突变体酶K234A的α-、β-和γ-CD产物比为64:25:9 （质量比），酶活性与野生酶相比变化不大。Y89位点的突变酶已有文献报道[17-18]，取代不同的氨基酸会导致产物专一性的变化较大。