《表1 引物信息:月季RhMYB96转录激活及表达特性分析》
以月季EST数据库(Dai et al.,2012)中受失水和乙烯诱导MYB的Unigene序列为模板,设计5'RACE和3'RACE扩增特异性引物(表1)并进行PCR扩增。PCR反应体系为:10×PCR buffer 2μL,dNTP(2.5 mmol/L)1.6μL,上下游引物(10μmol/L)各1μL,总c DNA(1μg/μL)1μL,Ex Taq聚合酶(5U/μL)0.1μL,以ddH2O补足至20μL。PCR反应程序为:94℃5 min;94℃30 s,60℃30 s,72℃1min,30个循环;72℃5 min,4℃保存。利用琼脂糖凝胶电泳对PCR产物进行检测,目的条带通过TSINGKE DNA Gel Extraction Kit(北京TSINGKE公司)进行回收;回收产物与载体pMD18-T过夜连接。连接产物转化大肠杆菌(Escherichia coli),以PCR检测为阳性克隆的菌液交由青岛派森诺生物科技有限公司测序。
图表编号 | XD0038777800 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.03.25 |
作者 | 丁爱琴、李绍翠、刘庆超、王奎玲、刘庆华、姜新强 |
绘制单位 | 青岛农业大学园林与林学院、青岛农业大学园林与林学院、青岛农业大学园林与林学院、青岛农业大学园林与林学院、青岛农业大学园林与林学院、青岛农业大学园林与林学院 |
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