《表3 ψe计算数据表：紫花苜蓿MtNAC51转录因子生物信息学和表达特性分析》

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《紫花苜蓿MtNAC51转录因子生物信息学和表达特性分析》

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实时定量PCR以紫花苜蓿GAPDH作为内参，苜蓿Mt NAC51为目的基因，采用Premier 5.0进行引物的设计（表3），Quantagene q225实时荧光定量PCR仪完成荧光定量PCR试验，反应体系（10μL）如：2×Cham Q Universal SYBR q PCR Master Mix （Vazyme）5μL，c DNA 1μL，终浓度为10μmol/L的上下游引物各0.2μL，dd H2O 3.6μL。加入上述反应成分，离心混匀后置于实时荧光定量PCR仪进行扩增，扩增程序为：95℃变性10 s，59℃退火30 s，72℃延伸30 s，共循环40次。反应完成，分析溶解曲线来确定PCR产物的特异性，采用2-△△Ct法计算基因相对表达量。