《表1 内参基因引物信息：近零磁场下灰飞虱转录表达分析稳定性内参基因筛选》

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《近零磁场下灰飞虱转录表达分析稳定性内参基因筛选》

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用Trizol法提取分别来自于NZMF和GMF中的初羽化灰飞虱短翅雌、雄成虫总RNA，每个样品设置3个生物学重复和3个技术重复。由微量分光光度计（型号:NanoDrop 2000C，美国Thermo公司）检测试验样本的RNA浓度和质量，将样本RNA统一调至100 ng，参照PrimeScriptTM RT Reagent Kit with gDNA Eraser（Perfect real-time）试剂盒的说明书进行反转录得到c DNA，稀释20倍后采用20μL反应体系进行荧光定量PCR，参见SYBY Premix Ex Taq试剂盒:（1）反应体系（总体积20.0μL）:SYBR?Premix Ex TaqTM（Tli RNaseH Plus）10.0μL，ddH2O 7.8μL，Forward Primer（10μmol·L-1）0.4μL，Reverse Primer（10μmol·L-1）0.4μL，ROX Reference Dye II 0.4μL，c DNA1.0μL；（2）反应条件:95℃30 s；95℃5 s，60℃34s，40个循环；熔解曲线:95℃15 s；60℃1 min，95℃15 s。引物和保守序列分别为Actin（Actin1）、Tubulin（α1TUB和α2TUB）、Elongation factor 1 alpha（EF-1α）、Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase（GAPDH）、Ubiquitin（UBI）、Ribosomal protein S11（RPS11）、Ribosomal protein S15e（RPS15）、Ribosomal protein L8（RPL8）、Ribosomal protein L9（RPL9）和ADP ribosylation factor2（ARF2）（表1）。