《表2 布氏鲳鲹CCK基因克隆和荧光定量引物》

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《布氏鲳鲹CCK基因的克隆及表达分析》

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参考本实验室布氏鲳鲹转录组数据库中CCK基因序列，利用Primer premier 5.0软件设计引物F1和R1（表2），以第1链cDNA为反应模板进行PCR扩增，反应程序为:94℃5 min；94℃30 s，58℃30 s，72℃1 min，35个循环；72℃10 min；4℃结束反应保存。PCR产物经1%TAE琼脂糖电泳检测，切胶回收目的DNA片段，连接载体pMD19-T，转化到DH5α感受态细胞中，涂板到氨苄选择培养基后过夜恒温培养，挑选单克隆进行菌液PCR检测后送上海生工测序。