《表1 实时荧光定量PCR引物》

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《白桦BpJMJ18基因启动子克隆及表达分析》

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利用CTAB法[22]分别提取盆栽生长2个月白桦顶芽、幼叶、成熟叶、初生茎、过渡茎、成熟茎及根的RNA，利用Ta Ka Ra公司的反转录试剂盒将其总RNA反转录为c DNA，反转录的c DNA稀释10倍作为定量PCR的模板，选用18S基因作为内参，其在NCBI网站的登录号为:MK388236.1，来检测目的基因在不同组织部位的表达情况。定量PCR使用的相关引物如下表1所示，反应体系为:20μL；其中2×SYBR Green 10μL，ROX DyeⅡ0.4μL，正向引物（JMJ18-RT-F）和反向引物（JMJ18-RT-R）各0.8μL，反应程序为:95℃30 s；95℃5 s；60℃35 s；40cycle；95℃15 s；60℃1 min；95℃15 s。每个样品设置3次生物学重复，并通过2-ΔΔCt法进行数据分析。