《表1 PCR扩增引物序列》

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《血液分离大肠埃希菌喹诺酮类抗菌药物的耐药机制研究》

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对大肠埃希菌质粒介导的喹诺酮类药物相关耐药基因[包括qnrA、qnrB、qnrC、qnrD、qnrS、aac（6′）-Ib-cr]及外排泵基因（包括oqxA、oqxB、qepA）进行检测，引物序列见表1，引物设计参照文献[2-3]。肠杆菌基因间重复性一致序列-聚合酶链反应（ERIC-PCR）使用引物ERIC2单引物扩增（AAG TAA GTG ACT GGG GTG AGC G），扩增反应试剂使用rTaq Premix PCR。筛查反应体系如下（总体积20.0μL）:rTaq Premix 10.0μL，模板1.0μL，去离子水8.2μL，上下游引物（10.0μmol/L）各0.4μL。扩增所需条件如下：94℃4 min；94℃40s、55℃40s、72℃40s，35个循环；72℃5 min。扩增产物经琼脂糖凝胶（1%琼脂糖）电泳，根据电泳结果分析，将出现阳性条带的PCR扩增产物送上海生物工程股份有限公司测序分析，并经BLAST比对确认。