《表3 GRF基因表达分析的引物序列》

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《苹果miR396家族鉴定及在不定根发育过程中的表达分析》

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根据克隆得到的GRF序列设计定量引物（表3），并参照樊胜等（2016）的苹果（GenBank登录号DQ341381）内参基因特异性引物Actin-F:5′-ATTCAAGTATGCCTGGGTGC-3′；Actin-R:5′-CAGTCAGCCTGTGATGTTCC-3′。利用RNAprep Pure Plant kit（天根）试剂盒对样品组织的总RNA进行提取，反转录cDNA为模板，用SYBR?Premix Ex TaqTM(Tli RNaseH Plus）试剂盒在Bio-RADIQ5上进行qRT-PCR反应。反应体系参照李珂等（2018）的配置。采用2-ΔΔCT法（Livak&Schmittgen，2001）计算基因的相对表达量。