《表1 基因表达分析引物序列》

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《小麦苗期氮素响应的生理及分子差异研究》

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采集不同处理下生长3周的小麦植株，液氮速冻，-80℃保存备用。RNA提取采用OMEGA植物提取试剂盒进行，操作按照试剂说明书进行。c DNA合成按照Primerscript RT reagent kit进行操作。氮素吸收利用相关基因引物序列根据前人研究合成[10，15-18]，并在网站（http：//202.194.139.32/blast/viroblast.php和Enzemble plants）上进行序列确认，引物具体序列见表1。q RT-PCR采用Quant Studio 6 Flex实时荧光定量PCR系统（美国ABI公司），以Ta Actin基因为内参基因，检测基因的表达量变化。反应体系为：c DNA 1μL，Mix 5μL，primer各0.25μL，H2O 3.5μL。每反应设置3次机械性重复和生物学重复，根据Ct值，利用公式2-ΔΔCt，计算基因的相对表达量。