《表1 PCR各基因引物序列》

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《补阳还五汤对Cav-1~(-/-)小鼠脑缺血模型PI3K、Akt、PTEN表达的影响》


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从引物银行下载基因序列,用Primer premier 6.0进行引物设计,由上海生工生物工程有限公司合成,引物序列见表1。运用Trizol法提取脑组织总RNA;检测RNA浓度及质量;两步法反转录c DNA;PCR反应:预变性95℃、2 min,变性95℃、15 s,退火58.2~60.8℃,40个循环。溶解曲线反应程序:95℃、15 s,60℃、15 s,温度缓慢上升(20 min)。β-actin为内参基因,用2-ΔΔCt进行相对定量,表示该基因相对表达量。ΔCt值=基因Ct值-内参Ct值,ΔΔCt值=实验组ΔCt值-对照组ΔCt值。