《表1 PCR各基因引物序列》

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《基于NALP3炎性体的痛风宁对急性痛风性关节炎大鼠抗炎作用量效和时效研究》

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液氮中充分研磨滑膜组织，按Trizol法提取组织总RNA。分光光度计测定样品OD260 nm/OD280 nm值，计算每管RNA浓度。按试剂盒说明书进行反转录-聚合酶链反应合成c DNA，依次加入相应体积RNA溶液（按3μg上样量计算），再用ddH2O定容至18μL，然后加入4×gDNA 6μL至24μL，混匀后离心，置于PCR仪（42℃、2 min），再加5×q Rt Super MixⅡ6μL至30μL，荡匀后离心，置于PCR仪（50℃、15 min，85℃、2 min）进行反转录。随后进行RT-qPCR反应，扩增目的基因产物，条件：95℃、30 s预变性，95℃、10 s变性，60℃、30 s退火延伸，40个循环。计算ΔCt值，以2-ΔΔCt分析各基因相对表达量。从Gene bank查找目的基因CDS序列，利用Primer 5.0设计引物，并委托上海铂尚生物技术有限公司合成，以β-actin为内参，引物序列见表1。