《表1 各基因PCR引物序列》

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《DNMT1基因沉默对前列腺癌细胞增殖、凋亡及GSTP1、SHOX2、DAPK甲基化状态的影响》


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收集各组LNCap细胞,参照Trizol试剂盒提取细胞总RNA,将RNA反转录为cDNA,各基因引物见表1,引物均由上海生物工程股份有限公司合成。qRT-PCR反应体系为20μl:SYBR Green 10μl,c DNA 1μl,ddH20 8μl,上下游引物各0.5μl。反应程序:95℃15 s,58℃20 s,72℃15 s,共40个循环。DNMT1、GSTP1、SHOX2、DAPK均以GADPH为内参基因,采用2-ΔΔCt法计算其相对表达量。