《表3 各基因PCR引物序列》

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《基于Rho/Rock通路当归红芪多糖对H9C2细胞放射性心肌损伤的影响》

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SOD、MDA、GSH检测时严格按ELISA试剂盒说明书进行，主要步骤包括:加样0.1 mL样本后37℃孵育1 h，洗涤3次后滴加酶标抗体0.1 mL，37℃孵育1 h，洗涤后加显色液0.1 mL，37℃孵育30 min，最后终止反应并检测。PCR检测时根据总RNA提取试剂盒说明书提取细胞中总m RNA，并根据表1要求配制反转录体系。反转录程序:25℃、5 min，42℃、60 min，70℃、10 min，4℃保存。扩增体系见表2。扩增程序反应设置:95℃、2 min，95℃、15 s，60℃1 min，40个循环。检测细胞m RNA的表达，引物序列见表3。Western blot检测时依次提取制备蛋白样品、配制凝胶、电泳、转膜、封闭、一抗孵育、二抗孵育、曝光，浓缩胶电泳（80 V），分离胶电泳（120 V），转膜（80 V、120 min），采用Bio-RAD检测条带，并用Bio-RAD Quantityone图像分析软件检测；流式细胞术检测细胞凋亡，按AnnexinⅤ-FITC试剂盒说明书进行。