《表1 PCR各基因引物序列》

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《针药结合对脑卒中肢体痉挛大鼠脑组织海马γ-氨基丁酸a型受体和脑源性神经营养因子表达的影响》

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采用Trizol一步法提取总RNA，获得RNA溶液，置于-80℃冰箱保存备用。RNA中DNA消除：37℃，30 min；Hold，加1μL EDTA；65℃，10 min。总RNA中DNase1消除：将反应液加入与其等量的苯酚/氯仿/异戊醇，充分混匀，适量DEPC-H2O溶解，进行反转录。反应条件：42℃，60 min；70℃，15 min；16℃，循环；反转录产物置于-20℃保存备用。将制备好c DNA进行PCR扩增，反应程序：95℃、3 min，95℃、5 s，56℃、10 s，72℃、25 s，39个循环；65℃、5 s，95℃、50 s。计算ΔCt值，以2-ΔΔCt分析各基因相对表达量。以β-actin作为内参基因，引物由南京金斯瑞生物科技有限公司合成，详见表1。