《表1 qRT-PCR验证所选基因及对应引物信息》

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《基于iTRAQ技术的干旱胁迫下玉米苗期蛋白质组学研究》


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使用RNAiso试剂盒(宝日医生物技术有限公司)对各样品进行总RNA提取。获得的总RNA再各取1μg使用TransScript One-Step gDNA Removal and cDNA Synthesis SuperMix试剂盒(北京全式金生物技术有限公司)进行基因组DNA的去除和cDNA的合成。合成的cDNA稀释10倍后用于qRT-PCR检测,检测设备为ABI 7900HT(赛默飞世尔科技)。qRT-PCR选择SYBR Prime Script RT-PCR试剂盒(宝日医生物技术有限公司),每个样品需进行3次技术重复。检测所获数据使用2-ΔΔCt法进行分析。选择玉米actin基因作为内参基因,检测引物为Fw:5’-CT-GAGGTTCTATTCCAGCCATCC和Rev:5’-CCAC-CACTGAGGACAACATTACC,根据蛋白丰度差异选择17个基因用于qRT-PCR验证,基因及检测引物等相关信息详见表1。