《表1 油菜内参基因和CAX家族基因qRT-PCR引物信息》

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《甘蓝型油菜钙离子转运蛋白CAX家族基因生物信息学及其对镉胁迫响应表达分析》

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为确定甘蓝型油菜CAX家族基因组织表达模式及对Cd2+胁迫的表达变化，利用实时定量PCR测定了CAX家族基因的相对表达情况。在提取RNA后，用Prime ScriptTM RT reagent Kit对RNA进行反转录，采用SYBR Premix Ex TaqTM II进行RT-q PCR反应，试验过程均按各试剂盒的使用说明书进行。RT-qPCR反应采用20μL体系:SYBR Premix Ex Taq II 10μL，正、反向引物各0.8μL（10μmol·L-1）cDNA 2μL，ddH2O 6.4μL。反应程序为:95°C，3min；95°C，10 s；60°C，30 s；72°C，30 s，40个循环。以BnaEF1-α为内参。采用2-ΔΔCT方法计算各基因的相对表达量。RT-qPCR反应设置3次技术重复，采用DPS 7.05软件对结果进行差异显著性分析。所用引物序列见表1。