《表1 靶基因和内参基因q PCR引物信息表》

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《大米草黄酮对食管癌EC9706细胞侵袭力的影响和作用机制》


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取DMC-fla处理组与对照组的EC9706细胞各3组为样本,分别提取细胞总RNA与Micro RNA,分光光度计检测RNA和mi RNA纯度和浓度,OD260/230在1.75~2.10。按照反转录试剂盒说明书合成一链c DNA为q PCR模板,按照q PCR试剂盒说明书于荧光定量PCR仪上对候选靶基因ITGB6、Serpine1和mi R-205进行q PCR扩增。采用GAPDH为基因表达内参,U6为Micro RNA表达参照,SYBRGreen荧光染料法相对定量,2-??CT法计算差异表达倍数以验证转录组测序所筛选出的候选靶基因,每样本重复3次。q PCR反应引物设计如表1所示。