《表1 Real-time PCR目的基因和内参引物序列》

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《白细胞介素-23 p19 RNA干扰对结肠炎小鼠模型的治疗作用》

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取100 mg结肠组织，加入1 m LTRIzolTM试剂提取总RNA，测定总RNA浓度。取5μg总RNA置于冰浴无RNA酶离心管中，加入引物Oligo（dT）16，70℃保温5 min后迅速于冰上冷却，然后加入dNTPs、M-MLV逆转录酶和RNA酶抑制剂，于实时荧光定量PCR系统中42℃温浴60 min，95℃加热终止反应。以得到的cDNA为模板，加入IL-23、IL-17、TNF-α引物（表1）、Taq酶和SYBR荧光染料，行real-time PCR，反应条件:95℃预变性3 min，60℃退火10 s，72℃延伸15 s，循环40次。2-△△Ct法计算目的基因mRNA相对表达量。