《表1 NPHP1基因内微卫星和内参标记引物序列信息》

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《多种方法结合对一个肾单位肾痨患者家系的基因筛查验证》

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1.2.2.2根据Heninger等[6]报道的方法检测NPHP1基因纯合缺失片段，PCR扩增父母、患儿、弟弟的候选基因NPHP1内多个微卫星标记del-2，del-5-（5）2，del-9，del-10，del-16及内参标记D2S1896，RanBP11/12。各引物序列及扩增片段大小见表1。反应体系:10×Buffer 2.5μL，Mg2+2.5mmol/L，dNTP 0.2 mmol/L，上下游引物各0.4μmol/L，模板DNA 1μL，双蒸水补至25μL。扩增条件:95℃预变性5 min；95℃变性30 s，58℃退火30 s，72℃延伸30 s，35个循环；72℃继续延伸10min。扩增产物4℃保存。琼脂糖凝胶电泳检测各位点PCR扩增产物的有无及片段大小。