《表1 AMEL基因和内参基因引物序列》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《燃煤来源的过量氟对仔鼠牙胚中釉原蛋白基因表达的影响》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

注：ACTB表示β-肌动蛋白。

将新鲜取出的下颌切牙牙胚组织置于去酶EP管中，加入RNA抽提试剂（Trizol）裂解液1 mL，使用匀浆机研磨裂解。4℃、12 000r/min离心5min，吸出上清液至1.5mL的去酶EP管中，加入氯仿，充分混匀，静置5 min，4℃、12 000r/min离心15min，取无色上清液至新EP管中，加入相同体积异丙醇，颠倒混匀，4℃、12 000r/min离心10min，弃上清液，沉淀用75%乙醇洗涤，室温干燥。将沉淀溶解于适量焦碳酸二乙酯（DEPC）水中。计算RNA的浓度，将产物浓度统一稀释至500 ng/μL备用。设计并合成AMEL基因和内参β-actin荧光定量PCR引物（大连工程有限公司设计合成），引物序列见表1。Gene Bank比对验证无误，按逆转录试剂盒说明书取1μg总RNA为模板进行逆转录合成cDNA，20μL体系。反应条件：37℃15min，85℃5s，4℃持续至实验结束。