《表1 内参基因引物序列信息》

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《近零磁场下粘虫雌蛾内参基因转录表达稳定性评价》

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利用Beacon Designer软件设计引物（Bustin，2002），对粘虫内参基因：β-肌动蛋白（β-Actin）、β-微管蛋白（β-TUB）、TATA盒结合蛋白（TBP）、延伸因子（EF-1α）、甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）、18S核糖体RNA(18S r RNA）、28S核糖体RNA(28S r RNA）、c GMP依赖性蛋白激酶（PKG）、核糖体蛋白L12(RPL12）和腺苷三磷酸酶（ATPase）进行引物设计。引物的合成由上海生物工程有限公司完成。选择PCR扩增效率在90%-120%之间的引物序列进行后续实验，最后用于稳定性评价的内参基因序列如表1所示。荧光定量PCR采用20μL体系，反应过程：35个循环，在95℃下变性15 s，在退火温度60℃下变性30 s，在72℃下延长30 s。绘制熔解曲线，采用2-??Ct法计算相对表达量。上述反应在Bio-Rad仪器上进行。每次均在同一96孔反应板上进行，每一个反应技术重复3次。