《表1 候选内参基因的引物序列》

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《苯酚胁迫下多刺裸腹溞实时定量PCR内参基因的筛选》

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引物设计、内参基因的扩增及PCR产物纯化从NCBI数据库获得多刺裸腹溞三个内参基因β-actin、16S rRNA和12S rRNA的CDS序列，并利用Primer 3软件设计了特异性引物（表1）。以不同浓度苯酚处理样品的cDNA等量混合物为模板，扩增反应条件为94℃预变性3min，94℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸1min，35个循环，72℃延伸8min。将PCR扩增产物按照SanPrep柱式DNA胶回收试剂盒（上海生工提供）方法进行两轮回收，得到三个纯化的PCR产物作为标准品，用分光光度计检测标准品浓度，并送公司测序（上海生工）。