《表3 候选内参基因引物序列》

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《翼首草实时荧光定量PCR内参基因筛选》


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试验中6个候选内参基因(Actin,18S,TUBa,TU-Bb1,TUBb2和GAPDH)运用Premier 5.0在线软件(朱建峰,2013)设计qPCR特异性引物(表3),由苏州金唯智生物科技有限公司合成。利用Thermal Cycler Dice TP800实时荧光定量PCR仪,采用TransStart Top Green qPCR Supper Mix(全式金生物科技)试剂盒,RT-qPCR程序设定为:95℃预变性30 s;95℃变性5 s,60℃退火30 s,40个循环;60℃,30 s,95℃,15 s进行溶解曲线分析。试验设定3个技术重复。