《表1 候选内参基因的引物序列》

《表1 候选内参基因的引物序列》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《达氏鲟实时荧光定量PCR内参基因的筛选》


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本实验选取常用的7个内参基因作为达氏鲟成鱼不同组织、不同发育时期胚胎、精巢和卵巢的候选内参基因,包括β-actin、EF-1α、GAPDH、RPL8、18S rRNA、SDHA和α-tubulin。根据这7个候选内参基因在GenBank数据库中的核苷酸序列,其基因登录号分别为MH790260、MH790258、MH790259、MG722843、FJ688019、MN750321、MN750320,运用Primer Premier 5.0软件设计引物,引物序列见表1,所有引物均由天一辉远生物科技有限公司合成,以11个成鱼组织的cDNA为模板进行PCR扩增,产物经1.5%的琼脂糖凝胶电泳检测引物特异性,克隆并测序。将11个达氏鲟成体组织的cDNA等重量混合,按照1:5比例稀释5个梯度(1、1/5、1/25、1/125、1/625),以其为模板进行qRT-PCR扩增,绘制标准曲线,计算扩增效率和相关系数。