《表1 用于qRT-PCR表达验证的基因及其引物》

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《AtDREB1A基因过量表达对马铃薯生长及抗非生物胁迫基因表达的影响》

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为分析AtDREB1A基因表达情况、验证RNA-Seq结果的可靠性，以qRT-PCR检测AtDREB1A基因和6个转录组鉴定出的上、下调表达基因。用RNA simple Total RNA Kit（TIANGEN）试剂盒提取胁迫后转基因植株和非转基因对照上部相同部位叶片总RNA，采用First strand cDNA Synthesis Kit（THERMO）试剂盒反转录成cDNA。以反转录的cDNA为模板，用ABIPRISMR 7300实时荧光定量PCR仪（ABI，USA）进行实时荧光定量分析，试验设3次重复。反应体系为25μL，按照SYBR Premix Ex Taq（TaKaRa）反应系统，以马铃薯EF1α基因为内参，用AtDREB1A基因特异引物和DEGs序列引物（表1）进行扩增，反应条件为95℃预变性3 min；95℃变性10 s，56.9℃退火30 s，40个循环。用Rotor-Gene软件分析CT值，采用2–ΔΔCT计算差异表达水平。