《表2 载体构建PCR扩增引物》

《表2 载体构建PCR扩增引物》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《茶树N-甲基转移酶基因启动子克隆及功能分析》


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据生物信息学分析结果及CAAT-box、TATA-box等顺式作用元件的线性分布,设计5'端引入HindⅢ酶切位点的引物pA-F、pB-F、pC-F、pD-F和5'端引入Xba I酶切位点的引物p-R(表2),以鉴定含克隆启动子的重组子为模板,用引物组合pA-F/p-R、pB-F/p-R、pC-F/p-R、pD-F/p-R分别扩增5'端序列依次缺失的4个启动子。扩增引物经Xba I、HindⅢ双酶切后,插入经同样酶切回收的pBI121载体以替换其CaMV35S启动子。连接产物转化大肠杆菌DH5α并将筛选到的重组子进行PCR和测序鉴定,构建出4个5'端序列依次缺失的克隆启动子融合GUS基因的转基因载体pA、pB、pC、pD(图1)。