《表1 PCR扩增引物：靶向CS1的CAR-T细胞构建及其抗肿瘤活性的体外研究》

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《靶向CS1的CAR-T细胞构建及其抗肿瘤活性的体外研究》

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由苏州金唯智生物科技有限公司合成Anti-CS1 sc Fv序列，将载体p Lenti-EF1α-T2A-lucgfp （本实验室保存）用SmaⅠ/MluⅠ双酶切，利用无缝克隆技术将片段和载体连接，37℃连接1 h后，转化涂于氨苄抗性LB平板上，通过挑单克隆、抽提质粒、酶切验证后测序鉴定重组载体p Lenti-EF1α-CS1 sc Fv-4-1BB、p Lenti-EF1α-CS1sc Fv-ICOS和p Lenti-EF1α-CS1 sc Fv-ICOS-4-1BB。以CS1全长c DNA序列（由厦门大学韩家淮实验室赠送）为模板，CS1FOR和CS1REV为引物扩增CS1片段，将载体p Lenti-EF1α-T2A-lucgfp （本实验室保存）用SmaⅠ/Eco RⅠ双酶切，利用无缝克隆技术将片段和载体连接，37℃连接1 h后，转化涂于氨苄抗性LB平板上，通过挑单克隆、抽提质粒、酶切验证后测序鉴定重组载体p Lenti-EF1α-CS1-T2A-lucgfp质粒，用于CS1阳性靶细胞的制备。根据Gen Bank中基因序列设计PCR扩增引物，见表1。