《表1 PCR实验中使用的引物》
收集转基因果蝇与对照组果蝇各100只用于RT-PCR实验。总DNA/RNA提取按照天根生化科技(北京)有限公司相关说明书进行。果蝇RNA提取后先进行定量,再将RNA中的m RNA反转录成c DNA,取1μL反转录产物与果蝇总DNA进行PCR检测,使用引物为E5-s/E5-a,扩增程序为:98℃预变性30 s;98℃变性10 s,64℃退火10 s,72℃延伸30 s,进行30个循环;最后72℃延伸2 min,4℃保存。RNA内参引物为m Gapd-s/m Gapd-a,扩增程序同上,PCR反应结束后,进行琼脂糖凝胶电泳检测,观察目的基因的整合情况及其表达。引物序列见表1。
图表编号 | XD00225189100 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.10.25 |
作者 | 王蓝晨、唐勤敏、何宇锋、王颖、杨仕赛、朱贵明 |
绘制单位 | 贵州医科大学生物与工程学院、贵州医科大学生物与工程学院、贵州医科大学生物与工程学院、贵州医科大学生物与工程学院、贵州医科大学生物与工程学院、贵州医科大学生物与工程学院 |
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