《表2 PCR实验中使用的引物》

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《子痫前期胎盘组织环状RNA表达谱的鉴定、验证与分析》


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注:a,该circ RNA在circ Base没有匹配到对应的名称,由测序平台命名

利用实时荧光定量PCR技术(real-time quantitative PCR,RT-PCR)对鉴定出的circRNA表达水平进行验证。采用Trizol法提取12对胎盘组织(子痫前期组、正常组各12例)中的RNA,提取后的RNA按照逆转录试剂盒(Prime Script TM RT reagent Kit,Takara,大连,中国)的说明合成cDNA,然后采用荧光染料法进行扩增。操作在CFX96 Touch TM Real-Time PCR检测系统(Bio-Rad,USA)进行。使用的SYBR Green购自Roche公司(Mannhein,德国),特异性引物由上海Invitrogen公司合成,见表2。GAPDH作为内参基因,退火温度为60℃。Ct值的分析采用2-△△Ct法进行分析。