《表1 本研究中使用的PCR引物》

《表1 本研究中使用的PCR引物》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《口蹄疫病毒IRES RNA元件与宿主蛋白eEF1a相互作用抑制病毒复制的研究》


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参照GenBank中鼠源eEF1a基因序列(NM_007906.3),设计引物eEF1a-F和eEF1a-R(表1)。利用TRIzol法提取BHK-21细胞的总RNA,以经反转录获得的c DNA为模板,采用引物eEF1a-F/eEF1a-R扩增e EF1a基因,利用同源重组法将e EF1a基因片段克隆到经Eco R I和Eco R V双酶切的pcDNA-HA真核表载体中获得pcD-NA-HA-eEF1a重组质粒。以px458质粒为模板,使用引物EGFP-F/EGFP-R(参照质粒px458基因序列设计,见表1)扩增EGFP片段,利用同源重组法将EGFP基因片段克隆到经Eco R I和Eco R V双酶切后的pcDNA-HA载体中构建pcDNA-HA-EGFP重组质粒。以上所得重组质粒均经PCR和测序验证。