《表1.本研究所使用的PCR引物》

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《一株新的砷还原菌分离鉴定及其对天然矿物臭葱石的溶解作用》


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本研究所使用样品为湖北省仙桃市沙湖镇夹河村(北纬30.1°,东经113.6°)钻井深度为90 m的高砷沉积物[22],采样地点如图1所示。将1.5 g新鲜厌氧保存的沉积物样品加到已高温灭菌且除氧的10.0 mL MM培养基,加入5.0 mmol/L乳酸钠和1.0 mmol/L As(V)分别作为体系中的电子供体和受体。将此混合液完全密封且避光于30°C的恒温摇床培养。每隔12 h取样检测As(V)被还原的情况。当As(V)完全转变为As(III)后,再抽取1 mL原始富集液转接到与初始富集完全一致的培养基中。待As(V)完全还原,则继续转接,往复操作3次,得到砷还原功能的菌液[18],梯度稀释菌液,利用Hungate厌氧滚管技术分离获得纯培养菌株。砷还原菌的16S rRNA基因、砷还原酶基因(arsC)、硫代硫酸盐还原酶基因(phsA)、硝酸盐还原酶基因(nar)分别参考文献[28–30]进行扩增、克隆及鉴定,引物参考表1。