《表1 PCR引物序列:肠炎沙门菌mreB基因缺失株的构建及其体外生物学特性研究》

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《肠炎沙门菌mreB基因缺失株的构建及其体外生物学特性研究》


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根据肠炎沙门菌P125109基因组(NC_011294.1)mreB基因序列和p KD4载体序列设计引物。引物H1和H2分别带有mreB基因两翼40 bp序列作为同源臂,用于扩增其同源重组序列。在SM6基因组同源重组部位的外侧设计引物mreB-Id-F/R,用于同源重组过程中菌株的鉴定,野生型菌株PCR扩增产物为2 660 bp,卡那霉素基因替换mreB基因后则PCR产物为3 493 bp,卡那霉素基因片段被消除后则PCR产物为2 100 bp。引物mreB-F/R扩增mreB基因全长及其上游带有启动子区的307 bp片段,构建mreB基因回补质粒。引物由苏州金唯智公司合成,序列见表1。下划线表示同源臂,斜体表示酶切位点。