《表2 PCR扩增引物：稳定敲除CACYBP/SIP基因的MCF-7细胞株的构建及其细胞增殖的变化》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《稳定敲除CACYBP/SIP基因的MCF-7细胞株的构建及其细胞增殖的变化》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

puromycin抗性筛选后，DNA提取试剂盒基因组DNA，PCR扩增引物见表2；PCR反应系统为2×Taq Plus Master Mix10μL，Primer-F 1μL，Primer-R 1μL，基因组DNA1μL，ddH2O补足20μL。反应条件为94℃90 s，90℃30 s，55℃30 s，72℃60 s，35个循环，最后72℃5 min。因同一组内不同细胞中，同一靶位点的突变情况也是不同的，PCR产物能够形成错配位点被错配酶识别，从而根据切割条带判断sgRNA是否有活性。在新的PCR管中取PCR产物3μL，剪切酶缓冲液2μL，剪切酶1μL，ddH2O补足10μL，45℃反应20 min，加入2μL终止液，随后进行2%琼脂糖凝胶电泳检测。