《表1 HDAC基因家族纯合敲除细胞建立过程中使用的gRNA以及PCR引物Tab.1 The gRNAs and PCR primers used during the establishment o

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《利用epiCRISPR载体表达双sgRNA实现高效的HDAC基因编辑》

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质粒构建过程中使用的所有内切酶以及连接酶均来源于NEB.使用http:∥crispr.mit.edu:8079/?网址提供的gRNA设计工具，在目标基因的外显子区域设计临近的2段gRNA作为实验使用的gRNA.并且在gRNA目标区域附近设计PCR引物，用以在PCR后使用T7E1（NEB）酶切检测编辑效率.表1（见第414页）展示了实验中使用的gRNA以及相应的PCR连接引物以及检测引物.引物名称中数字代表gRNA间距.