《表1 正交试验L9(33)的因素和水平》

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《黄颡鱼暴发性出血病病原菌的分离鉴定及其生物膜形成特性》

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选取培养基种类（BHI、TSB和LB）、培养温度（25、30、35°C）和培养时间（48、72、96 h）3个因素，每一因素各取3个水平，按L9（33）进行正交试验（表1），通过测定生物膜溶解液的OD492值确定最佳成膜条件。微孔板结晶紫染色法[21]检测细菌生物膜的主要步骤为：在不同培养条件下将分离菌株培养至OD600值为0.5，取菌液加至96孔细胞培养板，200μL/孔，按表1中设置温度与时间进行培养，共做3个复孔，同时设置培养基做空白对照。培养结束后依次进行0.5%结晶紫染色、33%冰醋酸溶解结晶紫、酶标仪测定溶解液的OD492值，分析各试验组与空白对照组的平均OD492，以确定分离菌株形成生物膜的最佳条件。同时，参照Watnick等[22]方法使用扫描电镜观察生物膜。