《表1 疟原虫SSU r RNA基因巢式PCR引物》

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《基于线粒体细胞色素氧化酶亚单位3基因鉴定贵州省首例输入性卵形疟病例》

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按照DNA抽提试剂盒说明书提取病例的滤纸血DNA，参考文献[7]，合成疟原虫属特异性引物（1对）和种特异性引物（4对，恶性疟原虫、间日疟原虫、三日疟原虫和卵形疟原虫各1对）（表1）。巢式PCR第一轮PCR反应体系（20.0μl）:DNA模板2.0μl，上、下游引物（10.0μmol/L）各0.6μl，预混液10.0μl，ddH2O 6.8μl。第二轮PCR反应体系（20.0μl）：第一轮扩增产物模板1.0μl，上、下游引物（10.0μmol/L）各0.6μl，预混液10.0μl，ddH2O 7.8μl。两轮PCR反应条件均为：94℃180 s；94℃30 s，58℃30 s，72℃60 s，共34个循环；72℃300 s。