《表1 巢式PCR引物序列》

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《辽宁省阜新市抗病毒治疗患者HIV-1 DNA耐药情况及亚型分析》

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0.2%Na Cl溶液富集抗凝全血中的白细胞，提取白细胞中的前病毒DNA，使用In-house HIV-1基因型耐药检测方法扩增HIV-1pol区PR和RT区基因，包括PR全长和RT前300个氨基酸[4]，引物序列见表1。第一轮PCR采用前病毒DNA为模板，以MAW-26和RT-21为引物，PCR反应条件如下：95℃预变性5min，95℃30 s，56℃30 s，72℃2 min，40个循环，72℃延伸10 min，4℃保存。第二轮PCR以PRO-1和RT-20为引物，PCR反应条件如下：95℃预变性5 min，95℃30 s，56℃30 s，72℃1min，40个循环，72℃延伸10 min，4℃保存。