《表1 HBu V1巢式PCR检测引物》

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《育龄期妇女人布法细小病毒感染研究——以湖北襄阳地区为例》

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根据发表于NCBI基因库HBu V1基因组序列（JQ918261.1），在HBu V1的ns1基因保守区设计两对引物ns1-F1/R1，ns1-F2/R2（表1）（注：该引物不能区分HBu V-1/2/3三个亚型），以血清中提取的HBu V病毒DNA作为模板，通过巢式PCR检测血清样本是否含有HBu V病毒。第一轮PCR反应条件：94℃预变性5 min，94℃变性30 s，58℃退火30 s，72℃延伸30 s，35个循环，72℃延伸10 min；待第一轮PCR循环结束后，取2μL PCR扩增产物作为第二轮PCR反应的模板，以引物F2/R2代替F1/R1，退火温度60℃，其余反应条件均不变。两轮PCR反应体系均为20μL，包括2μL提取DNA，10μL的2×Taq PCR Mix，正反引物各0.5μL×50 m M，7μL dd H2O。