《表1 猪毕氏微孢子虫巢式PCR扩增引物序列》

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《云南地区猪毕氏微孢子虫的分子检测及其基因型鉴定》

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采用巢式PCR扩增猪微孢子虫ITS序列，扩增引物参照Yue等（2017）的方法进行设计合成，引物序列如表1所示。PCR扩增分两轮进行，反应体系均为25.0μL。第一轮:94℃预变性5 min；94℃45 s，55℃45 s，72℃1 min，进行35个循环72℃延伸10min。第二轮:扩增程序与第一轮相同，目标片段390 bp左右。以2%琼脂糖凝胶电泳检测第二轮巢式PCR产物，阳性PCR产物送至深圳华大基因科技有限公司测序，测序结果在NCBI上进行BLAST比对，校正后提交至Gen Bank数据库。