《表1 巢式PCR引物序列》

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《阜新市HIV-1感染者和AIDS患者原发性整合酶基因耐药突变分析》

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核酸提取采用RNA病毒提取试剂盒QIAamp Viral RNA Mini Kit（QIAGEN公司）提取血浆样品中的病毒RNA，具体操作严格按照说明书进行。提取的RNA样品，通过反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和巢式PCR（n PCR）扩增HIV病毒pol基因整合酶基因区。引物由invitrogen公司合成，引物序列见表1。第一轮PCR采用一步法逆转录PCR（Super Script One-Step RT-PCR Kit，QIAGEN公司），以病毒RNA为模板，以INOF和INOR为引物，RT-PCR反应条件:95℃预变性5 min，95℃30 s，56℃30 s，72℃2 min，40个循环，72℃延伸10 min，4℃保存。第二轮PCR以INIF和INIR为引物，PCR反应条件:95℃预变性5 min，95℃30 s，56℃30 s，72℃1 min，40个循环，72℃延伸10 min，4℃保存。