《表1 本研究所用到的引物》

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《小麦芒长抑制基因B2的精细定位与候选基因分析》

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带星号（*）的标记参考Yoshioka等[18]2017年发表的文献。

采用CTAB法提取SL-F2群体叶片DNA[31]，利用SSRLocator软件[32]及内置的Primer 3程序进行SSR搜索与引物设计，参考Li等[33]采用CAPS/dCAPS Designer基于Wheat660K SNP芯片开发的标记进行修改完成CAPS和dCPAS标记的开发，所用标记的信息如表1所示，所有引物均由北京博迈德基因技术有限公司合成。PCR扩增体系总体积为20μL，包括50 ng模板DNA，0.2μmol L–1引物和1×Taq M a s t e r M i x（江苏康为世纪生物科技有限公司，CW0682L，包含0.2 mmol L–1 dNTPs、0.15 mmol L–1MgCl2和1 U Taq DNA聚合酶）。PCR扩增采用94℃预变性5 min，然后按照94℃变性30 s，55℃退火30 s（对于个别引物需根据具体情况调节退火温度），72℃延伸30 s（对于EST标记，延伸时间延长至2 min）的条件进行35个循环，最后72℃延伸10 min。SSR标记在PCR扩增后直接进行电泳，CAPS标记、dCAPS标记及EST标记在PCR扩增后采用相应的限制性内切酶酶切后电泳检测。限制性内切酶（美国NEB公司，购自生工生物工程 （上海）股份有限公司） 的酶切反应按照相应说明书进行。对于SSR标记PCR扩增产物和dCAPS标记的酶切产物，用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分离，而CAPS标记与EST标记的PCR产物和酶切产物用2%琼脂糖凝胶电泳分离检测。